欢迎访问深圳市安培生物科技有限公司网站
产品列表
Product categories

产品中心

所有  |  

悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂

悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂
悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂
悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂
悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂
悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂

转染(transfection)是真核细胞主动或被动导入外源核酸片段(DNA或RNA)而获得新的表型的过程。转染后的细胞会产生重组蛋白,或者特异性的增强/抑制细胞中的基因表达。转染后的检测主要包括基因水平和蛋白水平的检测。一定时间后收集转染处理后的细胞,采用超声或酶解的方法破碎细胞,离心得到上清。针对基因水平,使用普通PCR或RT-PCR进行验证,蛋白水平,使用westernblot检测,简单,快速,准确。转染的类型根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短,可以分为瞬转和稳转。根据转染方式可以分为化学方法,生物方法,物理方法。瞬时转染是指将构建好的质粒或者siRNA通过某种方式导入到哺乳动物细胞内(常用的工具细胞HEK293细胞),该外源核酸片段不整合到细胞自身的基因组上。随着细胞的生长分(fen)裂,外源基因会逐渐丢失,在细胞内能够存在3-4天,无法随着细胞的分(fen)裂进入到子代细胞中。在这一段时间内,外源基因在细胞内发生转录翻译,得到少量的蛋白。根据使用的载体不同,收集目的基因/蛋白进行检测的时间不同,通常在转染后48h,目的蛋白的表达水平(zui)高。瞬时转染的特点是短时间内进行蛋白的小量制备,满足后续的实验要求。稳定转染是外源DNA整合到细胞基因组中,成为细胞基因组的一部分从而得以复制,随着细胞分(fen)裂,子代细胞也同样表达外源基因,这就是稳定转染细胞的标志。稳定转染是建立在瞬时转染的基础上的,先对细胞进行转染,再对得到的细胞池进行筛选,筛选标记是抗生素,荧光报告基团等,通常需要2-3周的筛选时间,由此形成稳定转染的细胞系。稳定转染的特点是能够得到蛋白的大量、长期生产,满足后续的一系列体内体外的表型实验。

查看悬浮细胞转染试剂_细胞转染试剂全部详情 >>

 
网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图 | 排名推广 | 广告服务 | 积分换礼 | 网站留言 | RSS订阅
Processed in 6.652 second(s), 184 queries, Memory 5.76 M