5!合理计算灭菌时间灭菌时间包括：穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始到锅内难达到的部位也达到此温度所需要的时间；维持时间，即杀灭微生物所需要的时间，一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；安全时间，为使灭菌得到确切保证所需要增加的时间，一般为热死亡时间的一半，其长短视消毒物品而定！对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。在灭菌时间内，要注意观察压力表，以保持规定的压力，维持到灭菌时间为止!在灭菌过程中，如有压力、温度下降，应重新升温升压，重新计时.
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6.开盖操作达到灭菌时间后即可切断电源，在压力降到0！05MPa，可缓慢放出蒸气，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢！当压力降到零后才能开盖，取出培养基摆在平台上以待冷凝，不可久不放气，否则容易引起培养基成分变化以至无法制作斜面培养基.如果因为久不放气导致锅炉内产生负压、盖子打不开，可以将放气阀打开，让空气进入，内外压力平衡后盖子就可以打开了.7!灭菌后操作要求消毒物品干燥后检查指示剂，当达到灭菌要求时可出锅!
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4.排尽空气使用高压蒸汽灭菌器时，关键的是将锅内空气排尽。如锅内有空气，则气压针所指的压强不是饱和蒸汽产生的压强!相同的压强，混有空气的蒸汽其温度低于饱和蒸汽所产生的温度！因此完全排除锅内空气使锅内全部是水蒸气!常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0。05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀!关阀再通电后，压力表上到0！1MPa时，开始计时，维持压力到指定的时间!
高压蒸汽灭菌器是利用饱和压力蒸汽对物品进行迅速而可靠地消毒灭菌的设备，适用于医疗卫生、科研、农业等单位。高压蒸汽灭菌器按照样式和大小分为手提式高压蒸汽灭菌器、立式高压蒸汽灭菌器、卧式高压蒸汽灭菌器等!可对医疗器械、敷料、玻璃器皿、溶液培养基等进行消毒灭菌.分类按照样式和容积大小划分，高压蒸汽灭菌器可分为手提式高压蒸汽灭菌器、立式高压蒸汽灭菌器、卧式高压蒸汽灭菌器等[1].手提式高压蒸汽灭菌器的容积通常为18L、24L、30L!
灯油，火油，异戊醇，乙酸（醋酸），和其他燃点在30℃～65℃之间的类似物质！5.易燃的气体：氢气，乙炔，甲烷、乙烷，丙烷，丁烷等其他易燃气体。操作步骤1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜.2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品!注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果!3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内！再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气.
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