实验原理及目的 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用最为主要的方法之一。本实验的原理是在活细胞状态下通过化学交联剂将蛋白质-DNA复合物固定,南昌染色质免疫共沉淀公司,专业定制医药、保养,并将其随机打断成一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学的方法沉淀出目的蛋白质-DNA复合体,我们推荐南昌染色质免疫共沉淀公司,贵阳免疫球蛋白相关,南昌染色质免疫共沉淀公司,免疫球蛋白相关,从而特异性地富集与目的蛋白相结合的DNA片段。通过对目的DNA片断的纯化与检测,最终获得蛋白质与DNA相互作用的信息。染色质免疫共沉淀技术广泛的应用于表观遗传(组蛋白等)分析,转录因子结合位点分析等蛋白质与DNA结合的试验分析中。随着第二代测序技术的逐步完善和成熟,染色质免疫共沉淀结合第二代高通量测序技术(ChIP-seq)正逐步成为基因调控网络研究中一种非常有效的研究手段。
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染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是基于体内分析发展起来的方法,也称结合位点分析法,在过去十年已经成为表观遗传信息研究的主要方法。这项技术帮助研究者判断在细胞核中基因组的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰。ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌症、心血管疾病以及中央神经系统紊乱等疾病的主要通路的一种非常有效的工具。
实验步骤 A]实验材料的交联处理(室温): B]实验材料的染色质抽提(4度): C]染色质的超声波片段化(4度): D]染色质前处理和免疫共沉淀(4度): 孵育抗体和磁珠 染色质的预处理 免疫沉淀 E]洗脱蛋白质-DNA复合物并释放DNA(4度): F]纯化DNA(室温): G]对ChIP DNA进行定量: 结果分析: %Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%; Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)] 服务周期 20个工作日 材料条件 实验材料:ChIP级抗体,西安淳风生物科技有限公司,西安淳风生物科技有限公司,5ug/样本; 细胞:大于107 ; 动物组织:大于0.1g/样本; 植物组织:5g/样本。 交付结果 实验报告(实验仪器设备、试剂、实验方法、数据分析结果);