然而，SPAAC反应的反应速率本身就很低（例如0.1至0.9M–1s–1），限制了它们在相对高浓度应用中的使用（例如蛋白质-小分子偶联、细胞标记）！对于低生物分子浓度（例如5µM）的应用，逆需Diels-Alder连接对反式-环辛烯-四嗪（TCO–Tz）是一对选择!化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学（800M–1s–1）！超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质偶联）的理想配对。
COA提供了所使用的测试方法、结果和产品的纯度水平!货号名称CAS号1016TCO–NHSEster1192TCO–PNBEsterCAS1438415-89-4A137TCO–PEG4–NHSEsterCAS1621096-79-41398TCO–PEG4–TFPEster1088TCO–PEG4–Acid1355SulfoTCO–Maleimdie1021TCO–Amine,HClsaltCAS1609659-02-01188TCO–PEG3–Amine1356AFDye488TCO1358AFDye568TCO1089Cy5TCO1124TetrazineAcidCAS1380500-92-41125MethyltetrazineAcidCAS1380500-88-81073Methyltetrazine–PEG4–AcidCAS1802907-91-01128Methyltetrazine–NHSEsterCAS1644644-96-11127Tetrazine–NHSEster1193Methyltetrazine–Sulfo–NHSEster1191Tetrazine–Sulfo–NHSEster1069Methyltetrazine–PEG4–NHSEsterCAS1802907-92-11399Methyltetrazine–PEG4–STPEster1143Tetrazine–PEG5–NHSEsterCAS1682653-80-01068Methyltetrazine–PEG4–Maleimide1011MethyltetrazineAmine,HClsaltCAS1092689-33-21130toolTetrazineAmine,HClsaltCAS1092689-33-21012Methyltetrazine–PEG4–Amine,HClsaltCAS1802908-05-91013Methyltetrazine–PEG4–Alkyne1022MethyltetrazineDBCO1014Methyltetrazine–PEG4–Azide1361AFDye488Tetrazine1357AFDye555Tetrazine1364AFDye594Tetrazine1189Cy5Tetrazine1027Cy7Methyltetrazine1117DBCOAcidCAS1353016-70-2A101DBCO–C6–Acid1CAS425485-72-8A101PDBCO–PEG5–AcidCu–自由点击化学（SPAAC）•生物相容性反应发生在温和的水性缓冲条件下•不需要催化剂或辅助试剂•生物正交对（DBCO/叠氮化物）表现出长期水稳定性•市面上有多种叠氮化物和环辛烯（如DBCO）•动力学对于相对高浓度的应用（例如，蛋白质-小分子缀合、蛋白质-肽缀合）足够快逆需求Diels-Alder反应•极快的动力学（800M–1s–1）允许在60分钟或更短时间内以1mg/mL的速度进行有效的蛋白质-蛋白质结合•生物相容性反应发生在环境温度下温和的水性缓冲条件下•不需要有毒催化剂或辅助试剂•四嗪和TCO改性的生物聚合物在水性储存中保持活性（在4°C下储存数周）•四嗪类药物和TCO不易获得，但可在市场上买到.
上海牧荣生物科技有限公司，具体产品品牌可上我司网站上查询！质量保证 价格取胜 信誉地址：上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 我们将尽全力为您提供优惠的价格及快捷细致的服务，希望能对您的工作有所帮助！更多产品详情请联系：经理 17621170138。
生物正交激活的组分仅相互特异性和自发地反应，形成所需的缀合物！这种生物正交连接策略如图1所示为了使化学反应性官能团适合生物偶联，三个基本特征是非常重要的：反应性、化学选择性和生物相容性。第*个反应性显然是在高稀释条件下进行应用的先决条件，例如蛋白质-蛋白质偶联！由于蛋白质的可用性有限和/或相关的成本因素，蛋白质-蛋白质偶联通常被限制在低蛋白质浓度（例如1mg/mL）.反应性可以由生物正交反应物对的二阶速率常数来定义.
因此，只有一小部分化学转化适用于在环境温度下在pH中性的水性环境中对高度官能化的生物分子（如蛋白质、核酸和糖）进行生物正交连接，同时仍保持生物功能。适合特定应用的特定连接策略的选择基于不同的因素！铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应（CuAAC）的使用*限于铜毒性不重要的应用（例如肽或寡修饰，或细胞裂解物标记）。在这方面，菌株促进的炔烃-叠氮化物环加成反应（SPAAC）更适合生物偶联，因为不需要催化剂或额外的试剂!
超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质）的理想配对结合。示例应用程序使用20倍摩尔过量的四嗪-PEG5–NHS酯在BupH缓冲液（pH5）中标记五个山羊IgG样品（100µL，5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL）!类似地，在BupH缓冲液（pH5）中以0mg/mL的浓度标记0。1mLHRP（500µg），使用将20倍摩尔过量的TCO–PEG4–NHS酯持续60分钟.
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产物形成的二阶速率常数越高，在合理的时间尺度内，在接近中性的pH下，在低反应物浓度下，在不需要使用大量过量的情况下，偶联就越有效任何一种生物分子.生物正交反应物在10µM下的二阶速率常数（M–1s–1）与随时间变化的共轭产率百分比之间的关系如图2所示！反应物的另一个重要的生物偶联特征是它们具有化学选择性.也就是说，在其他生物官能团（例如氨基（-NH2）、羧基（-COOH）和/或硫醇（-SH））的丰富环境中，彼此之间具有选择性反应性.
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