完备的实验室配套设施完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等. 疾控PCR实验室基本要求PCR实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域!只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可.各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通.产物分析区或三个区域的一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求!
试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂!对与气流压力的控制,本区应对外界保持微正压。标本制备区该区域主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成!本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动!
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PCR(聚合酶链反应)是一种基因检测技术,可以通过复制DNA样本来扩增特定的DNA序列!在PCR实验室工程中,科学家们使用PCR仪器和试剂来扩增目标DNA,并对其进行分析以获取有关该DNA的信息!以下是有关PCR实验室工程的简要介绍.首先,在进行PCR实验之前,科学家需要准备样品!这可能涉及到从组织中提取DNA或RNA,或者从血液或唾液等生物体液中分离出DNA!提取DNA后,科学家须确保其具有足够的纯度和浓度,以便可以进行PCR扩增反应!
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为避免交叉污染,进入各个工作区域须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增和扩增产物分析区。各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行.实验室空调通风系统设计及压力控制PCR实验室并没有严格的净化等级要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式!同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求! 试剂贮存和准备区该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备!
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用于基因检测,具有高度敏感性、特异性、快速、简单等特点,能将传统方法难以检测的病毒DNA片段扩增百万倍以上,从而大大提高疾病的诊断水平!它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术!标准的实验室设计规划:PCR实验室平面布局PCR扩增检验实验室原则上分为三个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增和扩增产物分析区。
PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下:试剂准备区仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等!可使用超净工作台作为试剂配制操作台面.标本制备区仪器设备主要应有生物(为B2,可避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果!此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。扩增区主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的).