绝大多数细胞因子受体存在着可溶性形式,掌握可溶性细胞因子受体产生的规律及其生理和病理意义,必将扩展人们对细胞因子网络作用的认识.检测细胞因子及其受体的水平已成为基础和临床免疫学研究中的一个重要的方面。为了维持机体的生理平衡,抵抗病原微生物的侵袭,防止肿瘤发生,机体的许多细胞,特别是免疫细胞合成和分泌许多种微量的多肽类因子。它们在细胞之间传递信息,调节细胞的生理过程,提高机体的免疫力,在异常情况下也有可能引起发烧、炎症、休克等病理过程.
后来,人们认识到细胞因子主要由白细胞合成,主要介导白细胞间的相互作用,于是将这些因子统一命名为白细胞介素(interleukin,IL),并按发现的先后顺序冠以阿拉伯数字进行命名,如IL-l、IL一IL-3等.自1957年Lssac发现干扰素以来,迄今已经发现了200多种细胞因子!人们将所有白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、造血因子、生长因子、趋化因子等统称为细胞因子!现代基因工程和细胞工程技术的快速发展,为发现更多的细胞因子和研究其结构与功能提供了技术条件,细胞因子的研究成果为临床上预防、诊断、治疗疾病提供了科学基础,特别是利用细胞因子治疗肿瘤、感染、造血功能障碍、自身免疫性疾病等,具有非常广阔的应用前景[1]。
这样一大类因子已发现的有上百种,统称为细胞因子,包括淋巴细胞产生的淋巴因子、单核细胞产生的单核因子、各种生长因子等!许多细胞因子是根据它们的功能命名的,如白细胞介素(IL)、干扰素(IFN)、集落刺激因子(CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、红细胞生成素(EPO)等!重组细胞因子要求:真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE,RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性!
根据产生细胞因子的细胞种类不同分类细胞因子淋巴因子(lymphokine)于命名,主要由淋巴细胞产生,包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等!重要的淋巴因子有IL-IL-IL-IL-IL-IL-IL-10、IL-1IL-1IL-1IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神经白细胞素等!单核因子(monokine)主要由单核细胞或巨噬细胞产生,如IL-IL-IL-TNF-α、G-CSF和M-CSF等.非淋巴细胞、非单核-巨噬细胞产生的细胞因子主要由骨髓和胸腺中的基质细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等细胞产生,如EPO、IL-IL-1SCF、内皮细胞源性IL-8和IFN-β等.
纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度!生物活性:进行相应的体外(invitro)或体内(invivo)活性检测!蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液!内毒素:kineticLAL法检测内毒素!微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理.重组细胞因子的状态:市场上主流的重组蛋白产品,多在不含载体蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的条件下,以低盐的形式做冻干处理,因此微量(多以微克计量)的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层,所以建议在收到试剂后,务必于开盖前先离心20-30秒,使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于冻干馆的底部(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。
重组人粒细胞因子
细胞因子肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)初发现这种物质能造成肿瘤组织坏死而得名.根据其产生来源和结构不同,可分为TNF-α和TNF-β两类,前者由单核-巨噬细胞产生,后者由活化T细胞产生,又名淋巴毒素(lymphotoxin,LT)!两类TNF基本的生物学活性相似,除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生!大剂量TNF-α可引起恶液质,因而TNF-α又称恶液质素(cachectin).
由免疫细胞(如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等)和某些非免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等)经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质.细胞因子一般通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应,调控免疫应答。细胞因子(cytokine,CK)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、APSC多能细胞以及损伤组织修复等多种功能!
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