2）用1ml4℃预冷PBS轻轻重悬细胞并计数，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清！3）再加入1ml4℃预冷的PBS重悬细胞，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清.b)贴壁细胞：1）吸出细胞培养液至离心管中，PBS洗涤贴壁细胞一次，加入适量不含EDTA的胰酶细胞消化液消化细胞.2）室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化.3）加入以上步骤中收集的细胞培养液，稍混匀，转移到离心管内，1000-2000rpm离心5min，小心吸除上清.
对于贴壁生长的细胞，由于在胰酶等消化处理过程中会造成细胞膜的损伤，会造成较高的假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测，可将胰酶消化后的细胞保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤.尽管目前，包括国外也有一些单位采用该方法检测贴壁生长的细胞！我不推荐用该方法检测！因为其重复性较差，且需要操作时非常小心。消化贴壁细胞残留的胰酶会消化并降解AnnexinV-FITC，最终导致染色失败！细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品.
如果您想咨询细胞凋亡检测更多信息，请致电华伟：19126518388；珍惜与每个对Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒有需求的企业、个人 能有进一步的交流机会，欢迎各大企业、个人光临公司本部，深圳市安培生物科技有限公司详细地址：深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1。
因此采用AnnexinV与PI双染的方法，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来.试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C操作说明：细胞样品的准备：a)悬浮细胞：1）收集细胞至离心管中1000-2000rpm离心5min，小心去除上清!
流式细胞凋亡检测
试剂盒组份：Reagents/20assays/50assays/100assays/StorageAnnexinV-FITC产品货号：FI001/100μl/250μl/500μl/4°C避光PropidiumIodide,PI产品货号：PI002/200μl/500μl/1000μl/4°C避光BindingBuffer(4×)产品货号：BU002/4ml/10ml/20ml/4°C所需实验器材：微量移液器；PBS；不含EDTA的胰酶消化液；低速离心机；流式细胞仪注意事项：此试剂盒仅供研究使用.
关于细胞凋亡检测，作为一家主营产品为Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒的厂家，深圳市安培生物科技有限公司在生物化工这个行业中都享负盛名，在业界中也有一定的地位。
微量试剂需离心数秒将试剂收集至管底后再开盖取用!PropidiumIodide（PI）有毒，操作时要带手套，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触！AnnexinV-FITC中含有剧毒成分叠氮化钠（NaN3）,操作时要带手套，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。本试剂盒用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1x106。染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加!AnnixinV检测凋亡细胞的方法适用于悬浮生长的细胞，如：淋巴细胞等细胞的检测!
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