6IR(辐照)钴60伽马辐照剂量在5Mrad.通过直接与间接作用将生物大分子(如核酸)键结破坏,人畜用药物/疫苗,及对微生物负荷(Bioburden)要求高水平的实验!7HI(热灭活)处理血清56℃,30Min,破坏补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解!8胚胎干细胞(ES)专用血清是从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。9间充质干细胞(MSC)专用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试!
悬浮细胞培养用澳洲胎牛血清
目前中国市面上的血清多来自澳洲、南美等地!二是全球对胎牛血清的需求量逐渐上升,而全球的产量并没有随之提高,牛血清仍然是畜牧加工业的一个副产品,因此会有供不应求的现象和原料上涨的趋势。中国市场上假冒胎牛血清时有出现!尤其是冒充一些有名的进口品牌!市面上有许多添加超量细胞因子的高度仿品牌血清,通过瓶子外观和标签,非常难以辨识.由于其价格格外便宜,导致购买者常常上当,后面造成的实验不能得到准确结果,数据无法重复,实验进度拖延等后果,对实验室造成不可预期的影响。
国内很多胎牛血清供应商,由于一个批次存货有限,当实验室二次购买时,大多不能保证同一批次,因此会产生实验数据由于批间差异而造成的不稳定,从而影响实验结果的评估.同时,如果对于频繁换批号的胎牛血清,每一次都专门对新批号试用,其工作量也实属太大,在实际工作中实为不便。一些进口血清不走正式报关程序,私自携带入境,即俗称“水货”。由于全程数天甚至十数天的冷链条件不能保证,造成血清反复冻融,会严重影响血清中因子的活性,造成血清性能下降,或时好时坏!
使用血清时的典型问题:01血清的颜色如何?为何有的胎牛血清颜色偏红,而有的偏黄?是因为胎牛血清颜色是由血红蛋白(鲜红)和胆红素(黄)决定的,主要是受血红蛋白影响。血红蛋白含量很低时,含少量胆红素,呈淡黄或金黄!血红蛋白含量高时,会呈现淡红色。需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻!02血清如何解冻,使用前是否需要过滤?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。
因此买来的血清不需要再次进行过滤!下图为人肉眼和光学显微镜所能观察到的微粒大小.由于我们的血清是经过3次0!1μm过滤,因此若肉眼可以观察到异物时,可以考虑:是否血清溶解后蛋白质凝集是否操作时导入污染物03为什么血清中会有沉淀生成,主要成分是什么,会对实验有什么影响?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),胎球蛋白[1],脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等.原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变.