注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败.质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒).复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失!
转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次,室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板!转染24小时后进行正常换液,不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液.原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基。难转染细胞高效率转染案例图赏:高效率转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞高效率转染NK细胞高效率转染THP-1悬浮细胞高效率转染人淋巴悬浮细胞ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250。
siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较:Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是毒性大;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果差).Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是相比Lip2000毒性略小;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果较差)!
产品说明:产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent储存条件常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融!包装规格货号:AD60002AD600050、AD60007AD600150、AD600500、AD601000规格:0!25ml、0。5ml、0。75ml、5ml、5ml、10ml使用说明:材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素)操作步骤提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染。
江苏真核细胞转染试剂的选择
25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500.5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750!75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元ZetaLife转染试剂产品详情:ZetaLife公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的AdvancedDNARNA第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一!