核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟.在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清!细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选!
ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中。ZetaLife转染试剂突出表现:ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等!
福建原代细胞转染试剂哪种好
RNA转染市面上所有的RNA,ZetaLife公司Advanced系列转染试剂都可以转染!客户承诺ZetaLife公司Advanced系列转染试剂对客户的承诺是Thermo公司的Lipo2000、Lipo3000、RNAiMAX转染试剂能转的DNA、RAN,Zetalife公司的Advanced系列转染试剂都可以转染!性价比ZetaLife公司Advanced系列转染试剂价格实惠Lipo20005ml市场成交价格3000-3400左右Lipo30005ml市场成交价格4400-4600左右RNAiMAX5ml市场成交价格6400-6800左右ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!
▲ZetaLife转染试剂与传统转染试剂的效果对比ZetaLife转染试剂高效率转染难转染细胞难转染细胞,高效率转染案例分享:转染RAW267小鼠单核巨噬白血病细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:RAW267;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7180FBS-500超低内毒胎牛血清转染人淋巴悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:人淋巴悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染NK细胞-自然杀伤悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:NK细胞-自然杀伤悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:3*106;转染试剂用量:10ul;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染H9C2大鼠心肌细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:H9C2大鼠心肌细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清转染A549细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:A549细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7186FBS-500胎牛血清转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250.
ZetaLife品牌Advanced系列采用新型工业材料,不需要更换培养基;特点是不需要换液,无细胞毒性,转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA及小动物活体转染!ZetaLife转染试剂的优势:活体转染ZetaLife公司Advanced系列转染试剂是全球独一个可以做小动物活体转染的转染试剂;脂质体转染试剂进入动物体后会迅速被分解掉,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,具有毒性,因此不能用于小动物活体转染;而ZetaLifeAdvanced系列转染试剂属于新型工业材料,进入小动物皮下,不会被分解掉,能够进入细胞中发挥作用。
在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛!转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术!随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术.
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理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点!病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势!但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及.其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点.无论采用哪种转染技术,要获得较优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化.影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑.