核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟。在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清。细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选!
▲ZetaLife转染试剂与传统转染试剂的效果对比ZetaLife转染试剂高效率转染难转染细胞难转染细胞,高效率转染案例分享:转染RAW267小鼠单核巨噬白血病细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:RAW267;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7180FBS-500超低内毒胎牛血清转染人淋巴悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:人淋巴悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染NK细胞-自然杀伤悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:NK细胞-自然杀伤悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:3*106;转染试剂用量:10ul;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染H9C2大鼠心肌细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:H9C2大鼠心肌细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清转染A549细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:A549细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7186FBS-500胎牛血清转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!
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siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较:Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是毒性大;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果差)!Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是相比Lip2000毒性略小;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果较差)!
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转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!深圳市安培生物科技有限公司是美国ZetaLife公司的中国深圳地区总代理!现货供应ZetaLife转染试剂,均经过反复充分验证,细胞转染效果好且重复性佳。ZetaLife转染试剂产品应用:各种细胞类型中有很高的转染效率;可用于多种真核细胞系的DNA转染、siRNA转染和共转染;可用于各种原代细胞的DNA转染、siRNA转染;可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞.
Thermo品牌RNAiMAX采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是专门用来转RNA,对于细胞系的转染效率一般,对干细胞和神经原代细胞转染效果差。Promega品牌FuGENE6采用脂质混合体、特定缓冲液,需要更换培养基;特点是本质还是脂质体;只能转DNA;含有微量动物源成分,适用细胞种类因此受限;转染前后需要更换培养基;亲塑性,转染效率会因使用PE管(塑料管)而大打折扣!Roche品牌FuGENEHD采用脂质混合体、特定缓冲液,需要更换培养基;特点是本质还是脂质体;只能转DNA;亲塑性,转染效率会因使用PE管(塑料管)而大打折扣。