ZetaLife品牌Advanced系列采用新型工业材料,不需要更换培养基;特点是不需要换液,无细胞毒性,转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA及小动物活体转染。ZetaLife转染试剂的优势:活体转染ZetaLife公司Advanced系列转染试剂是全球独一个可以做小动物活体转染的转染试剂;脂质体转染试剂进入动物体后会迅速被分解掉,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,具有毒性,因此不能用于小动物活体转染;而ZetaLifeAdvanced系列转染试剂属于新型工业材料,进入小动物皮下,不会被分解掉,能够进入细胞中发挥作用!
转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次,室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板!转染24小时后进行正常换液,不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液!原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基!难转染细胞高效率转染案例图赏:高效率转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞高效率转染NK细胞高效率转染THP-1悬浮细胞高效率转染人淋巴悬浮细胞ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!
注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer.溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败!质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒)。复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失!
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▲ZetaLife转染试剂与传统转染试剂的效果对比ZetaLife转染试剂高效率转染难转染细胞难转染细胞,高效率转染案例分享:转染RAW267小鼠单核巨噬白血病细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:RAW267;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7180FBS-500超低内毒胎牛血清转染人淋巴悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:人淋巴悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染NK细胞-自然杀伤悬浮细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:NK细胞-自然杀伤悬浮细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:3*106;转染试剂用量:10ul;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7010FBS-500胎牛血清转染H9C2大鼠心肌细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:H9C2大鼠心肌细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清转染A549细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:A549细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7186FBS-500胎牛血清转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞,使用AdvancedDNARNA转染试剂转染细胞:N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞;转染体系:12孔板;转染时间:48h;转染细胞起始数量:电讯;转染试剂用量:电讯;转染试剂:ZetaLife,AdvancedDNARNA转染试剂;培养细胞使用血清:ZetaLife,Z7181FBS-500胎牛血清ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250.
siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达!转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较:Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是毒性大;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果差).Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是相比Lip2000毒性略小;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果较差).