转染24小时后进行正常换液,不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液。原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基。转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250。25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500。5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750。
使用说明:材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素)操作步骤提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染!核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟!在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清.
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点!病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势!但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得较优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化.影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑!
ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250.25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500。5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750。75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元.
细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达.若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选.siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!
珠海免疫细胞转染试剂好用吗
细胞转染简介:随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具!在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛!转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术!随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法.转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术.
转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500!5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750!75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元产品说明:产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent包装规格货号:AD60002AD600050、AD60007AD600150、AD600500、AD601000规格:5ml储存条件常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融。