注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败!质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒)!复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失!
siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达.转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较:Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是毒性大;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果差)!Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体,需要更换培养基;特点是相比Lip2000毒性略小;转染前后需要更换培养基;可以转染质粒DNA、siRNA(效果较差)!
广州原代细胞转染试剂哪家好
转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!深圳市安培生物科技有限公司是美国ZetaLife公司的中国深圳地区总代理。现货供应ZetaLife转染试剂,均经过反复充分验证,细胞转染效果好且重复性佳.ZetaLife转染试剂产品应用:各种细胞类型中有很高的转染效率;可用于多种真核细胞系的DNA转染、siRNA转染和共转染;可用于各种原代细胞的DNA转染、siRNA转染;可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞!
RNA转染市面上所有的RNA,ZetaLife公司Advanced系列转染试剂都可以转染。客户承诺ZetaLife公司Advanced系列转染试剂对客户的承诺是Thermo公司的Lipo2000、Lipo3000、RNAiMAX转染试剂能转的DNA、RAN,Zetalife公司的Advanced系列转染试剂都可以转染.性价比ZetaLife公司Advanced系列转染试剂价格实惠Lipo20005ml市场成交价格3000-3400左右Lipo30005ml市场成交价格4400-4600左右RNAiMAX5ml市场成交价格6400-6800左右ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250.
ZetaLifeAdvanced系列高效率DNA、RNA转染试剂介绍:目前,一种新型的转染方式可实现高效率转染!美国ZetaLife公司推出ZetaLife转染试剂是全球首创进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂,对细胞无毒性,不易出现细胞死亡,不激活细胞免疫机制!ZetaLife转染试剂采用的是新型小分子多肽材料,其特点是非脂质体材料,大小是80nm左右,由于形状是圆形的,不会对细胞有物理性损伤,材料表面有特异性结合接头,只特异性识别DNA、RNA,对血清成分(如细胞因子、蛋白、内毒素等)不识别也不结合;特异性接头与核酸形成转染复合物,转染复合物通过细胞主动吞噬进入细胞,进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽材料,对细胞无内毒素影响,不易出现细胞死亡!
在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术.随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法!转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术!