转染24小时后进行正常换液，不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液!原代细胞、免疫细胞转染时，细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基!转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格：品牌：美国ZetaLife货号：AD6000250.25ml/1590元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000500。5ml/2390元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000750!
ZetaLifeAdvanced系列高效率DNA、RNA转染试剂介绍：我司代理ZetaLife转染试剂全球首创进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂，对细胞无毒性，不易出现细胞死亡，不激活细胞免疫机制。ZetaLife转染试剂采用的是新型小分子多肽材料，其特点是非脂质体材料，大小是80nm左右，由于形状是圆形的，不会对细胞有物理性损伤，材料表面有特异性结合接头，只特异性识别DNA、RNA，对血清成分（如细胞因子、蛋白、内毒素等）不识别也不结合；特异性接头与核酸形成转染复合物，转染复合物通过细胞主动吞噬进入细胞，进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽材料，对细胞无内毒素影响，不易出现细胞死亡!
ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞，如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等；可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中！突出表现：ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞；本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形，保持高的细胞活力；不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据；可转染免疫细胞、悬浮细胞等！
使用说明：材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素）操作步骤提前1天接种细胞：细胞汇合度在60-80%左右，再进行转染！核酸复合物制备：将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟.在细胞培养基中加入核酸复合物：根据参考用量在细胞中加入核酸复合物，并轻轻混匀；细胞培养基里面可以含有血清。
细胞换液：转染24小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液。分析结果：质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率，48-96小时检测mRNA或蛋白表达！若进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选！siRNA转染后9小时荧光检测转染效率，48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项：质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer！
上海转染质粒DNA转染试剂报价
ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格：品牌：美国ZetaLife货号：AD6000250.25ml/1590元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000500!5ml/2390元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000750.75ml/2890元品牌：美国ZetaLife货号：AD6001505ml/4490元品牌：美国ZetaLife货号：AD6005005ml/14580元品牌：美国ZetaLife货号：AD60100010ml/27480元.
溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右，甚至会转染失败！质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降70%-80%左右，甚至导致转染失败（推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒）!复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合，如果进行了稀释会导致转染失!转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次，室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板.
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