溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败!质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒).复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失。转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次,室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板。
我司主营生化试剂领域的企业,主要以转染试剂为主要产品,公司位于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1,更多产品信息详情请上http://www.ampere168.com查看。深圳市安培生物科技有限公司愿与社会各界朋友共同合作、共创双赢、共创精彩明天!
细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液!分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer.
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ZetaLifeAdvanced系列高效率DNA、RNA转染试剂介绍:我司代理ZetaLife转染试剂全球首创进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂,对细胞无毒性,不易出现细胞死亡,不激活细胞免疫机制。ZetaLife转染试剂采用的是新型小分子多肽材料,其特点是非脂质体材料,大小是80nm左右,由于形状是圆形的,不会对细胞有物理性损伤,材料表面有特异性结合接头,只特异性识别DNA、RNA,对血清成分(如细胞因子、蛋白、内毒素等)不识别也不结合;特异性接头与核酸形成转染复合物,转染复合物通过细胞主动吞噬进入细胞,进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽材料,对细胞无内毒素影响,不易出现细胞死亡.
75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元产品详情:ZetaLife公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的AdvancedDNARNA第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点!病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及!其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点.需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得较优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑.
ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中!突出表现:ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等!
使用说明:材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素)操作步骤提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染.核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟.在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清!
深圳市安培生物科技有限公司是一家专注生化试剂的企业,在原代细胞转染试剂领域深耕十几年,对于转染试剂,有着敏锐的市场嗅觉,丰富的优化经验,扎实的技术团队。秉承互利互惠,合作双赢的理念,坚持客户至上,信誉的原则。致力于从多渠道,多方位,多平台为客户提供的原代细胞转染试剂服务,并受到了客户的一致好评。
首先,必须要充分考虑项目所在地的水资源容量情况。众所周知,我国煤炭资源和水资源呈逆向分布,截止到2010年,晋、陕、蒙、宁、甘等五省区煤炭基础储量1846亿吨,占全国的66.1%,水资源总量却仅有1212亿立方米,仅占全国的3.9%。以上五省区人均水资源量更是普遍低于全国2310.4立方米的平均水平,其中宁夏、山西、甘肃人均水资源量分别只有148.2立方米、261.5立方米和841.7立方米,除去居民生活用水,农业用水,和已有的工业用水之外,可供进一步开发利用的水资源已然不多。而煤化工,特别是现代煤化工项目又恰恰均是耗水量特别巨大,如果项目上马过多,必然会对水资源本已匮乏的西北地区生态环境造成进一步的破坏。由于水资源缺乏,部分企业盯上了黄河水,为了不影响整个黄河流域的经济社会发展,国家有关部门需要对中上游沿途省区不同季节取水量进行严格限定,促使各地根据可供开发利用的水资源数量来合理规划煤化工项目。