使用说明:材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素)操作步骤提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染。核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟!在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清。
细胞转染简介:随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具.在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术.随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法!转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术!
ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中.突出表现:ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等.
转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250。25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500!5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750!75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元产品说明:产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent包装规格货号:AD60002AD600050、AD60007AD600150、AD600500、AD601000规格:5ml储存条件常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融!
佛山转染试剂哪家好
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细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液!分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达.若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选!siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!
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主导钢厂对后市的判断并不划一,有的乐观,有的谨慎。武钢率先出台了11月份的板材价格政策,对热轧和冷板主流产品的出厂价每吨上调了100至150元。不过,随后宝钢出台的定价政策并未“跟随”,而是连续第2个月选择了“平盘”,反映出宝钢对后期板材市场的判断十分谨慎,仍以保证合同的正常组织为主。至于建筑钢厂家,有些是上半周全面上调了之后,到了下半周又小幅下调。值得注意的是,中钢协统计的重点企业9月下旬钢材库存量旬环比下降了8%以上,已降至今年2月份以来的最低水平。这表明钢厂合同组织的压力已明显减轻。9月份全国的粗钢日均产量估计也是环比下降的。